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細胞(Cells)是由英國科學(xué)家羅伯特·胡克(Robert Hooke,1635~1703)于1665年發(fā)現的。當時(shí)他用自制的光學(xué)顯微鏡觀(guān)察軟木塞的薄切片,放大后發(fā)現一格一格的小空間, [1] 就以英文的cell命名之,而這個(gè)英文單字的意義本身就有小房間一格一格的用法,所以并非另創(chuàng )的字匯。
當收到了常溫的細胞,正確的處理方式應該是怎樣的。
一、首先,觀(guān)察細胞培養瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象。
二、用75%酒精擦拭細胞培養瓶表面,顯微鏡下觀(guān)察細胞狀態(tài)。因運輸問(wèn)題,部分貼壁細胞會(huì )有少量叢瓶壁脫落;先不要打開(kāi)培養瓶蓋,將細胞置于細胞培養箱內趨置培養2-4小時(shí),以便穩定細胞狀態(tài)。
三、仔細閱讀細胞說(shuō)明書(shū),了解細胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細胞形態(tài)、所用基礎培養基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
四、靜置完成后,取出細胞培養瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài);建議細胞傳代培養后,定期拍照、記錄細胞生長(cháng)狀態(tài)。
五、貼壁細胞:若細胞生長(cháng)密度超過(guò)80%,可正常傳代;若未超過(guò)80%,移除細胞培養瓶?jì)扰囵B基,預留5m左右繼續培養,直至細胞密度達80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
六、懸浮細胞:將細胞培養瓶?jì)纫后w全部轉移至50ml無(wú)菌離心管內,1200rpm離 心5min,離心后上清培養基可收集備用,管底細胞沉淀加入5m培養基吹打、重懸。鏡檢時(shí),若細胞密度超過(guò)80%,可將細胞懸液分至2個(gè)細胞培養瓶?jì)扰囵B,補加培養基至5ml;若細胞密度未超過(guò)80%,將細胞懸液移至原瓶繼續培養,直至細胞密,度達80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。
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